Synthetisch transfer RNA voor suppressie van CFTR nonsense mutatieWRITER: Isabelle Sermet

Nonsense mutaties door een prematuur stopcodon vertegenwoordigen 10% van de mutaties van het CFTR-gen.Vooralsnog zijn therapieën voor het doorlezen van stopcodons weinig effectief.  Zelfs gebonden aan een aminozuur dat doorlezen van het stopcodon aantoont, kan het zich schadelijk gedragen en eiwitvouwing beïnvloeden.  Een ander alternatief is het produceren van gemodificeerd transfer RNA om dit aan het gewenste aminozuur te binden.  Aangezien elk aminozuur verschillende tRNA codes heeft (tot wel 20), hebben de auteurs op basis van heterologe expressie een screeningsplatform ontwikkelt voor de identificatie van tRNA om zo de functie van de diverse nonsens-mutaties van het CFTR-gen te herstellen. Dit transfer RNA wordt ACE-tRNA genoemd (ofwel: anticodon editing). Het effect ervan werd in eerste instantie getest in cellijnen na transfectie. Ze zorgen voor expressie van een compleet eiwit. Met het Xenopus oocytemodel dat geschikt is voor co-expressie van mRNA van het CFTR-gen en ACE-tRNA, kon gecontroleerd worden of dit CFTR-eiwit tot expressie komt en er werd aangetoond dat deze werkzaamheid dosisafhankelijk was van t.a.v. tRNA.

Deze resultaten tonen het belang van deze benadering. Er zijn nog talloze onbekende factoren, met name als het gaat om celpenetratie, halfwaardetijd en aspecifieke bijwerkingen van ACE-tRNA.

https://www.biorxiv.org/content/biorxiv/early/2016/11/20/088690.full.pdf

Referencia

CONGRES NACFC 2017 - Vrijdag 3 november 2017
Workshop 12. Towards a one time cure. Technologies and editing
JD Lueck, Iowa